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核殼色譜柱沖洗與操作注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2016-08-24 點(diǎn)擊次數(shù):1877
核殼色譜柱沖洗  
沖洗核殼色譜柱在分析結(jié)束后,用流動相沖洗到基線平穩(wěn),然后用10%左右的有機(jī)溶劑沖洗色譜柱,主要是沖洗干凈流動相中的緩沖鹽。然后用100有機(jī)溶劑沖洗。是梯度變化沖洗。分析物可能為一些能溶解在水中,有些需要用純?nèi)軇┎拍?去除。如果分析時(shí)間緊迫一定要把鹽分沖洗干凈,一般情況不要用純水沖洗色譜柱,特別是反向柱的填料的鍵合集團(tuán)容易折斷,對核殼色譜柱造成損傷。核殼色譜柱被使用在某種程度上就是開始被污染了,所以色譜柱的壽命和我們使用的情況有很大的關(guān)系。雖然被污染但是對分析目標(biāo)物沒有造成影響我們也就是認(rèn)為還能用。  
 
核殼色譜柱操作注意事項(xiàng):
①防止任何固體微粒進(jìn)入泵體,因?yàn)閴m埃或其它任何雜質(zhì)微粒都會磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥,因此應(yīng)預(yù)先除去流動相中的任何固體微粒。流動相在玻璃容器內(nèi)蒸餾,而常用的方法是濾過,可采用Millipore濾膜(0.2m或0.45m)等濾器。泵的入口都應(yīng)連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應(yīng)經(jīng)常清洗或更換。
 
②流動相不應(yīng)含有任何腐蝕性物質(zhì),含有緩沖液的流動相不應(yīng)保留在泵內(nèi),尤其是在停泵過夜或更長時(shí)間的情況下。如果將含緩沖液的流動相留在泵內(nèi),由于蒸發(fā)或泄漏,甚至只是由于溶液的靜置,就可能析出鹽的微細(xì)晶體,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等。因此,必須泵入純水將泵充分清洗后,再換成適合于核殼色譜柱保存和有利于泵維護(hù)的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
 
③泵工作時(shí)要留心防止溶劑瓶內(nèi)的流動相被用完,否則空泵運(yùn)轉(zhuǎn)也會磨損柱塞、缸體或密封環(huán),zui終產(chǎn)生漏液。
 
④輸液泵的工作壓力決不要超過規(guī)定的zui高壓力,否則會使高壓密封環(huán)變形,產(chǎn)生漏液。
 
⑤流動相應(yīng)該先脫氣,以免在泵內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響流量的穩(wěn)定性,如果有大量氣泡,泵就無法正常工作。

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